NOTA IMPORTANTE:
Durante el proceso de autoclave el medio esta a 150ºC, por lo que si la botella se llena, la botella puede explotar. Por lo tanto para autoclavar usar sólo 2/3 del volumen total del frasco. Es decir, si el frasco es de 500ml llenarlo solo hasta 300 ml.
3) Autoclavar a 121ºC, 15 psi por 20 minutos
4) Deje el agar sobre el mesón para que se atempere. Usted puede acelerar el proceso de enfriamiento colocando el frasco bajo el agua fría, con mucho cuidado ya que el frio brusco hara que se formen burbujas que puede aumentar la presión del frasco, por lo que hay que liberar el gas cuidadosamente y manteniendo la esterilidad.
5) Una vez que el medio esta homogéneamente a 70ºC aproximadamente (Usted puede tocar la botella sin ser quemado) adicione el antibiótico a una concentración final de 100 μg/ml de penicilina y 50 μg/ml de kanamicina
6) Prenda la campana de flujo laminar media hora antes de servir el medio. Limpie la campana con alcohol al 70% y sirva el medio con la ayuda de un mechero.
7) Deje solidificar las placas con la tapa abierta, posteriormente tapelas y almacenelas dentro de la bolsa en que venían las placas.
8) Deje las placas a temperatura ambiente si las va a usar el mismo día, de lo contrario llevelas a 5ºC una vez que estén completamente frías para evitar que se condense el vapor el tapa de la placa.
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