Conteo de células en cámara de Neubauer
El total de la cuadricula de la cámara tiene 3 mm x 3 mm x 0,1 mm (profundidad). La primera división de la cámara es en 9 partes cada una de 1 mm x 1mm x 0,1 mm. el área de cada una de esas partes es de 0,1 mm3.
Las áreas de las esquinas están subdivididas en 16 partes. El área del centro esta subdividia en 5 partes y cada una de esas partes esta subsubdividida en 16 partes.
Se cuentan las células en una de las partes de la división, entre más partes se cuenten menos error de conteo hay.
Si las células a contar son de tamaño grande, se cuenta todo los cuatro cuadrantes de las esquinas. si las células son pequeñas, se cuenta por lo menos 5 de las 25 diviciones del cuadrante central.
Para hacer el calculo:
# de células contadas / volumen contado = células / mm3
- ej. células grandes (generalmente conidios de hongos )
cuadrante izquierdo superior: 14
cuadrante derecho superior: 12
cuadrante izquierdo inferior: 16
cuadrante derecho inferior: 15
14,25 (promedio) células / (1mm x 1mm x 0,1mm) * 4 (volumen contado) =
35.625 células / mm3
1mm3 = 1 microl
1ml = 1000 microl
entonces,
35.625 * 1000 = 35.625.000 células / ml
- ejemplo células pequeñas
subcuadrante izquierdo superior: 14
subcuadrante derecho superior: 12
subcuadrante izquierdo inferior: 16
subcuadrante derecho inferior: 15
subcuadrante centro: 16
14,6 (promedio) células / (5/25) *(1mm x 1mm x 0,1mm) (volumen contado) =
14,6 células / 0,02 mm3 = 730 células / mm3
730 * 1000 = 730.000 células/ ml
NOTA IMPORTANTE
Montar la cámara dos veces y sacar el promedio de las dos montadas, la diferencia no debe ser grande. Si hay una gran diferencia, entonces contar de nuevo.
Al igual no debe haber gran diferencia entre los cuadrantes contados, si la hay entonces montar la cámara de nuevo.
homogenizar bien la suspensión antes de montar la cámara
Links de ayuda
cámara Neubauer
http://bdigital.eafit.edu.co/bdigital/PROYECTO/P660.62CDD259/anexos.pdf
http://cheserver.ent.ohiou.edu/ChE481/Project_Posted/neubauer_ruling.gif
http://images.google.co.ve/imgres?imgurl=http://www.ugr.es/~jhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/grid.gif&imgrefurl=http://www.ugr.es/~jhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/redcell3.htm&usg=__dYYC5QBiGwh_aPbW2KR7lEIl0tM=&h=300&w=300&sz=12&hl=es&start=9&um=1&itbs=1&tbnid=AZ2Nwqit8KvVWM:&tbnh=116&tbnw=116&prev=/images%3Fq%3Dneubauer%2Bphoto%26hl%3Des%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:es-ES:official%26sa%3DX%26um%3D1
Conversión de unidades
http://www.inforo.com.ar/convertir_volumenes
http://www.unitjuggler.com/convert-volume-from-l-to-ml.html
